二、检测方法
1.组织提取液制备:滤纸吸水后分别称出肿瘤组织及膀胱粘膜各50mg,置入Hepes缓冲液,匀浆器中反复研磨后,移入1.5ml Ependoff管中,离心取上清-20℃保存待测。
2.ELISA测定uPA含量:uPA标准品,血清及组织提出液用包被缓冲液稀释,加100μl/孔,4℃过夜,洗涤液洗板3次。加100μl/孔封闭液封闭已包被的酶标板,37℃,1小时,洗涤同上。加鼠抗人uPA (1∶500)100μl/孔,37℃,1小时,洗涤。加酶标羊抗鼠IgG100μl/孔,37℃ ,1小时,洗涤。加底物溶液OPD100μl/孔,避光反应25分钟,加H2SO4 50μl/孔终止反应,酶标仪(MS型)测出吸光度A值,由内置程序换算出含量。
3.统计分析,采用PEMS软件包q检验及t检验。
结 果
10例正常人血清uPA含量为(3.89±3.02)ng/ml,51例病人术前血清uPA含量为(4.08±3.43)ng/ml,术后1周为(3.51±3.21)ng/ml,三者比较差异无显著性。13例G3病人及15例浸润性癌病人术后较术前血清uPA无明显降低。
膀胱癌组织浸出液uPA平均含量为:14例G1(5.30±1.50)ng/ml,24例G2(13.34±9.53)ng/ml,13例G3(24.83±17.16)ng/ml。G3明显高于G1和G2级(P<0.01),G1与G2差异无显著性 (P>0.05)。36例浅表性膀胱癌组织浸出液uPA平均含量为(9.39± 6.49)ng/ml,15例浸润性癌平均为(25.70±17.13)ng/ml,二者比较差异具有显著性 (P<0.05)。10例非肿瘤膀胱粘膜及肿瘤旁粘膜浸出液uPA分别为(4.73±3.52)ng/ml ,(4.64±3.67)ng/ml ,二者之间及与G1间差异无显著性,但明显低于G2, G3及浸润癌组。
34例单发癌组织uPA平均为(14.65±13.60)ng/ml, 17例多发肿瘤组织uPA含量为(12.98±11.40)ng/ml,二者间差异无显著性。肿瘤直径小于2cm的32例病人肿瘤组织uPA含量(11.21±12.06)ng/ml,直径大于2cm
