日本血吸虫病
细胞制成悬液,再与受检血清混匀。如有相应抗体存在,红细胞凝集成颗粒状是为阳性反应。受检血清以1∶10稀释作为阳性反应起点。本法灵敏度可达90%以上,但与肺吸虫交叉反应率较高为其缺点。
(3)ELISA:受检血清如有相应抗体,即可与已吸附于载体(聚苯乙烯-PS微量反应板)上的抗原结合,再加入联结有辣根过氧化物酶(HRP)的抗抗体及酶催化底物(邻苯二胺、OPD),溶液显黄色即为阳性反应,结果可凭肉眼观察,亦可用分光光度计测定光吸收值(OD)。本试验的灵敏度在90%~100%间。假阳性反应在0~2.3%左右。近年来建立了适用于现场的简便、快速的ELISA方法,其主要特点为:用聚氯乙烯(PVC)凹孔薄膜替代PS板作载体;抗原预固相于载体上;增大反应系统浓度、缩短孵育时间;以抗人IgG单抗代替羊抗人IgG制备酶结合物;用无毒底物TMB替代OPD,该法只需20min左右即可完成全过程。与经典ELISA相比无显著差异,且稳定性和重现性较好。
(4)其他:有尾蚴膜试验、间接荧光抗体试验、免疫酶染色试验(IEST)、酶联免疫印渍试验(ELIB)、胶乳凝集试验(LA)、放射免疫测定(RIA)等。尽管近年来血清免疫学诊断方法的研究进展显著,但由于患者血清中抗体在治愈后持续时间长,不能区别既往感染与现症病人,对药物疗效考核价值不大。
2.抗原检测 检测抗原的明显优点为循环抗原(CAg)的存在表明活动性感染。血清(和尿)中CAg水平一般与粪虫卵计数有较好相关性。治疗后CAg较快消失,故有可能用于考核药物疗效。近年来开展单克隆抗体(单抗)技术,使检测CAg的灵敏度提高了10倍。检测抗原的种类有来源于成虫的肠相关抗原和表膜抗原,以及来源于虫卵的热休克抗原等。检测方法以反向间接血凝和夹心法ELISA为主。近年来中国医学科学院寄研所建立了单抗斑点-酶联法(Dot-ELISA)检测CAg诊断血吸虫病,获得了较满意的结果,用Dot-ELISA检测急、慢性血吸虫病患者血清样本,敏感性分别为90%和85%左右,特异性为98%。常人均阴性。
(五)粪便检查 常用粪检方法为尼龙绢集卵孵化法。集卵后取沉渣孵化可节省人力、时间、器材和用水量,并提高检出阳性率。同时可取沉渣3~4滴置载玻片上,抹成涂片置低倍镜下检查虫卵。虫卵计数可采用加藤(kato-katz)集卵透明法。以每克
(3)ELISA:受检血清如有相应抗体,即可与已吸附于载体(聚苯乙烯-PS微量反应板)上的抗原结合,再加入联结有辣根过氧化物酶(HRP)的抗抗体及酶催化底物(邻苯二胺、OPD),溶液显黄色即为阳性反应,结果可凭肉眼观察,亦可用分光光度计测定光吸收值(OD)。本试验的灵敏度在90%~100%间。假阳性反应在0~2.3%左右。近年来建立了适用于现场的简便、快速的ELISA方法,其主要特点为:用聚氯乙烯(PVC)凹孔薄膜替代PS板作载体;抗原预固相于载体上;增大反应系统浓度、缩短孵育时间;以抗人IgG单抗代替羊抗人IgG制备酶结合物;用无毒底物TMB替代OPD,该法只需20min左右即可完成全过程。与经典ELISA相比无显著差异,且稳定性和重现性较好。
(4)其他:有尾蚴膜试验、间接荧光抗体试验、免疫酶染色试验(IEST)、酶联免疫印渍试验(ELIB)、胶乳凝集试验(LA)、放射免疫测定(RIA)等。尽管近年来血清免疫学诊断方法的研究进展显著,但由于患者血清中抗体在治愈后持续时间长,不能区别既往感染与现症病人,对药物疗效考核价值不大。
2.抗原检测 检测抗原的明显优点为循环抗原(CAg)的存在表明活动性感染。血清(和尿)中CAg水平一般与粪虫卵计数有较好相关性。治疗后CAg较快消失,故有可能用于考核药物疗效。近年来开展单克隆抗体(单抗)技术,使检测CAg的灵敏度提高了10倍。检测抗原的种类有来源于成虫的肠相关抗原和表膜抗原,以及来源于虫卵的热休克抗原等。检测方法以反向间接血凝和夹心法ELISA为主。近年来中国医学科学院寄研所建立了单抗斑点-酶联法(Dot-ELISA)检测CAg诊断血吸虫病,获得了较满意的结果,用Dot-ELISA检测急、慢性血吸虫病患者血清样本,敏感性分别为90%和85%左右,特异性为98%。常人均阴性。
(五)粪便检查 常用粪检方法为尼龙绢集卵孵化法。集卵后取沉渣孵化可节省人力、时间、器材和用水量,并提高检出阳性率。同时可取沉渣3~4滴置载玻片上,抹成涂片置低倍镜下检查虫卵。虫卵计数可采用加藤(kato-katz)集卵透明法。以每克


























