辅助性化疗大大提高了Ⅲ期结直肠癌的无病生存期（DFS）。辅助性治疗出现以前，Ⅲ期结直肠癌（CRC）的3年无疾病生存率大约是44%~52%。
　　
　　5氟尿嘧啶（5-FU）单药治疗
 
　　通过使用不同的5-FU方案使得Ⅲ期结直肠癌病人的3年DFS提高到61%~67%。静脉推注5-FU联合亚叶酸（LV）的系列临床研究奠定了5-FU作为标准性辅助化疗的地位。研究结果确实对单药治疗方案提供了一些指导，如6个月疗程和12个月疗程的疗效相同；36周疗程的疗效并不明显优于24周；小剂量LV和大剂量的效果一样。随后的研究显示连续输注5-FU的方案比推注5-FU耐受性更好，两者的有效率和生存率相当。对于Ⅲ期的CRC病人，口服卡培他滨比推注5-FU/LV的耐受性更好，其疗效也相当（3年DFS是64%对61%）。QUASAR临床试验的结果提示Ⅱ期病人进行辅助5-FU治疗是有益的，和非辅助治疗相比，辅助治疗降低了5年复发率（22%对26%），且提高了总的生存率（80%对77%）
 
　　联合治疗
 
　　在辅助性化疗中5-FU/LV经常联合伊立替康和奥沙利铂。总体上5-FU联合伊立替康的方案还没有取得令人鼓舞的结果。静脉推注5-FU/LV和伊立替康的联合治疗方案与显著毒性作用相关。纳入1264例病人的CALGB C89803临床试验显示，5-FU/LV联合伊立替康的IFL方案和单独滴注5-FU/LV相比，DFS还略微低些。纳入400例Ⅲ期高危病人的ACCORD 2试验显示，滴注5-FU/LV联合伊立替康方案和单独滴注5-FU/LV相比，前者的3年DFS也略微低（51% 对 60%，P=0.22）。最近报告的PETACC3临床试验规模更大，包含2094例Ⅲ期患者。结果显示，与单独滴注5-FU/LV相比，滴注5-FU/LV联合伊立替康3年DFS提高了3%（63.3%对60.3%，无显著差异）。矫正分析表明，联合治疗组的3年DFS虽然提高程度很小但有显著差异（65.2% 对 60.4%， P=0.021）。
 
　　奥沙利铂和静脉推注5-FU/LV的联合治疗方案也有明显的毒性；不过，奥沙利铂和